Один из важнейших естественных ингибиторов свёртывания (активируемый фактор свертывания XIV). Протеин C проявляет антикоагулянтную (противосвертывающую) активность, ограничивает размеры тромба. Протеин С синтезируется в печени. Активность протеина С зависит от дефицита витамина K и терапии оральными антикоагулянтами. Определение протеина C – дополнительный тест для оценки состояния антикоагулянтной системы крови. Дефицит протеина С связан с высоким риском развития тромбоза (особенно венозного тромбоза и тромбоэмболии легочной артерии). Уровень протеина С у новорождённых и детей младшего возраста физиологически ниже, чем у взрослых. Врождённый дефицит протеина С связан со склонностью к тяжёлым тромботическим нарушениям. Дефицит протеина C связан с повышенным риском осложнений беременности (тромбоз глубоких вен, преэклампсия, внутриутробная задержка развития плода и повторные выкидыши). Отмечается увеличенный риск развития некроза кожи.
Врождённые дефицитные состояния могут быть диагностированы, когда причины приобретённого дефицита протеина C исключены. Рекомендованы повторные тестирования протеина C после прекращения терапии оральными коагулянтами (через месяц после окончания терапии) с обследованием членов семьи. Нарушение активации протеина С возникает при патологических состояниях, связанных с наличием таких факторов как гипоксия, эндотоксин, интерлейкин-1, фактор некроза опухоли альфа, высокий уровень гомоцистеина (все они ускоряют свёртывание, индуцируя экспрессию тканевого фактора и подавляя транскрипцию тромбомодулина эндотелиальными клетками). Особенностью антикоагулянтного действия протеина С является то, что он не оказывает влияния без протеина S, поэтому рекомендуется одновременное определение протеина С и протеина S.
Показания к назначению анализа:
- Подозрение на тромбофилию, в особенности у молодых людей (в комплексе с ислледованиями гемостаза).
- Тромбозы глубоких вен в молодом возрасте.
- Артериальные тромбозы в молодом возрасте.
- Невынашивание беременности.
- В прогностических целях при истощающих коагулопатиях (в т.ч. септических состояниях).
- Перед началом терапии антикоагулянтами непрямого действия.
- Подготовка к беременности.
Особые указания: Не проводить исследование во время острых периодов заболеваний и во время приема антикоагулянтных препаратов(после отмены должно пройти не менее 30 дней). Биоматериал на исследование необходимо сдавать натощак. Между последним приемом пищи и взяытием крови должно пройти не менее 8 часов.
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЯМ:
1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.
2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.
3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).
4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.
5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.
6. При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях – в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.
7. Кровь для исследований нужно сдавать до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены. Для оценки контроля эффективности лечения любыми препаратами нужно проводить исследование спустя 7–14 дней после последнего приема препарата.
Если Вы принимаете лекарства, обязательно предупредите об этом лечащего врача.
Синонимы: Протеин C, Protein C
Общие сведения
Протеин С относится к основным ингибиторам свертывания. Активная его форма связывает и деактивирует факторы свертывания, тем самым, регулирует процесс тромбообразования, замедляя его.
Информация, полученная из результатов теста на протеин С (% активности), позволяет предотвратить развитие тромбозов, назначить адекватное лечение пациентам с врожденным/приобретенным дефицитом компонента, снизить риск невынашивания и тромботических осложнений беременности.
Кровь поддерживается в жидком состоянии благодаря своевременной адсорбции факторов свертывания. В норме за этот процесс отвечают эндотелий (внутренняя поверхность сосудов) и антикоагулянты (антитромбин, протеин С и S). Протеин С играет роль главного активатора белков и адсорбента факторов свертывания.
Протеин С вырабатывается в печени. В кровяном русле он циркулирует в неактивном состоянии. Активируется на поверхности тромбоцитов и эндотелиальных клеток под воздействием тромбомодулина и тромбина. Активный протеин С:
- разжижает кровь;
- выступает противовоспалительным агентом;
- обеспечивает естественное отмирание клеток.
Дефицит протеина С
Недостаток протеина С приводит к возникновению тромбозов вен/артерий и нарушению кровообращения внутренних органов (инфаркт миокарда, инсульт, эмболия легких). У беременных может повыситься риск осложнений: преэклампсия и эклампсия, тромбоэмболия, тромбозы, внутриутробная задержка развития плода, замершая беременность, выкидыши, рождение мертвого ребенка, ДВС-синдром и т.д. Также низкий уровень протеина С является причиной некроза (отмирания) кожи.
Приобретенный дефицит протеина С. Причины:
- нарушение производства или ускоренный расход;
- нарушение структуры, функциональная непригодность;
- дефицит витамина К;
- заболевания печени, ее возрастная деградация;
- обширные ожоги или тяжелые травмы;
- серьезное хирургическое вмешательство;
- прием антикоагулянтов (варфарин и другие).
Врожденный дефицит протеина С
Ген дефицита передается по наследству представителям любого пола (до 0,5% случаев).
Определяется два типа носительства мутированного гена:
- гомозиготная – диагностируется у новорожденных и сопровождается ДВС-синдромом (закупорка мелких сосудов), неонатальной пурпурой (капиллярные излияния крови на коже) и т.д.;
- гетерозиготная – проявляется после полового созревания, повышает вероятность закупорки сосудов при низком ответе на лечение антикоагулянтами.
Врожденный дефицит протеина С у младенцев характеризуется нарушением производства достаточного количества протеина С печенью или секрецией дефектного белка, который не выполняет функцию антикоагулянта.
При диагностике патологии определяют два показателя: процент активности протеина С и его количество в крови. Анализ на протеин С также проводят для составления прогноза при септических состояниях (острое инфицирование крови). Если уровень активности снижается менее чем на 40% и в динамике уменьшается на 10% в сутки, то прогноз неблагоприятный.
Показания
Направление на анализ выписывает терапевт, флеболог, гематолог, неонатолог, гинеколог.
- Комплексное исследование системы свертывания крови (в рамках коагулограммы);
- Диагностика активности протеина С (в %) и его концентрации в крови;
- Дефицит протеина С в семейном анамнезе (носитель – прямой кровный родственник);
- Диагностика тромбозов вен и артерий, тромбофилии (в том числе у молодых пациентов);
- Определение причин тромбоэмболии у пациентов до 50 лет;
- Синдром Бадда-Киари (тромбоз печеночный вен);
- Закупорка почечных артерий;
- Планирование беременности у пациенток в группе риска;
- Осложнения беременности, выкидыши и мертворожденные в анамнезе;
- Диагностика тромботических состояний у новорожденных;
- Истощающие коагулопатии (патологическая кровоточивость);
- Септические состояния и гнойно-воспалительные заболевания в острой форме;
- Злокачественные процессы;
- Дефицит витамина К;
- Заболевания печени;
- Контроль терапии антикоагулянтами непрямого действия, например, варфарином;
- Некрозы кожного покрова на фоне приема варфарина.
Интерпретация результатов
В норме концентрация протеина С в крови зависит от возраста и составляет:
Примечание: у новорожденных и детей дошкольного возраста низкая концентрация протеина С обусловлена физиологической незрелостью печени.
Жидкое состояние крови поддерживается благодаря ее движению (снижающему концентрацию реагентов), адсорбции факторов свертывания эндотелием и, наконец, благодаря естественным антикоагулянтам . Важнейшие из них - это антитромбин III , протеин С, протеин S и ингибитор внешнего механизма свертывания . Точки приложения этих антикоагулянтов различны.
Протеин C играет важную роль в процессе активации белков в каскаде свертывания крови , поскольку гидролизует связанные с фосфолипидами фактор Vа и фактор VIIIа .
Кроме того, протеин С стимулирует выделение тканевого активатора плазминогена эндотелиальными клетками.
Протеин C (гликопротеин с молекулярным весом 62000 дальтон, предшественник сериновой протеазы) синтезируется в виде единой полипептидной цепи, содержащей легкую цепь с молекулярным весом 21000 дальтон и тяжелую цепь с молекулярным весом 41000 дальтон, соединенных дисульфидной связью.
Протеин C по аминокислотной последовательности и структуре высокогомологичен с тромбином и другими витамин К-зависимыми коагуляционными факторами - FVII, FIX, FX.
Переход на поверхности эндотелиальных клеток протеина С в активированную форму осуществляется за счет протеолиза, катализируемого тромбином , трипсином и тромбомодулином . Протеолиз сопровождается отщеплением препролидерной последовательности из 42 аминокислот сигнальными пептидазами и протеолитическим расщеплением прозимогена в положениях -1, 155, 157 и отщеплением соединяющего дипептида lys-arg. (Активация достигается расщеплением Arg-12-Leu пептидной связи в N-концевой части профермента и освобождением 12-членного полипептида).
Активированный белок C (АПСИ, от англ. activated protein С) является высокоспецифическим инактиватором факторов Vа и VIIIа. Инактивация происходит путем ограниченного протеолиза. Чувствительны к действию АПСИ только связанные с мембраной активные формы этих факторов. Неферментным кофактором АПСИ является белок S. Важность этого белка подтверждается тем фактом, что недостаточность его в крови человека сопровождается тромбоэмболическими заболеваниями.
В соответствии с высказанной гипотезой белок S и АПСИ образуют стехиометрический комплекс (1:1) на поверхности заряженных фосфолипидных мембран. Белок S увеличивает сродство АПСИ к мембране. Непосредственное взаимодействие этих белков осуществляется на поверхности эндотелиальных клеток и тромбоцитов , нативных и активированных различными агонистами.
Уровень протеина С не столь жестко связан с наклонностью к тромбозам, как уровень антитромбина III .
Снижение уровня антитромбина III, протеина С и протеина S или их структурные аномалии ведут к повышению свертываемости крови. Повышенная свертываемость крови характерна также для часто встречающейся аномалии фактора V ( лейденская мутация), при которой этот фактор становится устойчивым к действию протеина С. Этот дефект есть у 20-50% больных с рецидивирующими венозными тромбозами и рецидивирующими венозными эмболиями.
Белок C уникален среди известных белков протромбинового комплекса. Последние, как известно, содержат модифицированные остатки бета-гидроксилированной аспарагиновой кислоты ( Hya). В белке S Hya содержится только в первом G-домене, три другие домена содержат остаток бета-гидроксилированного аспарагина ( Hyn). Белок S - первый белок, в котором идентифицирован такой остаток. В настоящее время он обнаружен также в белках
Ген, ответственный за синтез протеина С, локализован на хромосоме 2 (ql3-ql4). Основная функция этого физиологического антикоагулянта заключается в инактивации основных неферментных факторов свертывания (FVa, FVIlla).
У пациентов, имеющих врожденную недостаточность протеина С, наблюдается склонность к рецидивирующим тромбозам и тромбоэмболиям. Дефицит протеина С наследуется аутосомно, гомозиготы и двойные гетерозиготы погибают в раннем детском возрасте от тромбозов.
Принцип метода
Метод основан на оценке АПТВ смеси (разведенный образец БТП, дефицитная по протеину С плазма, активатор протеина С, АПТВ-реагент). Протеин С исследуемого образца БТП активируют реагентом, полученным из яда щитомордника Agkistrodon contortrix. Активированный протеин С разрушает коагуляционные факторы Va и Villa, содержащиеся в смеси исследуемого образца и добавляемой протеин-С-дефицитной плазмы, за счет чего после добавления кальция хлорида регистрируется удлинение АПТВ. При низкой активности протеина С удлинение АПТВ выражено незначительно. Разведения калибровочного образца БТП позволяют построить кривую и определить активность протеина С.
Реактивы и оборудование
- Активатор протеина С (Protac).
- АПТВ-реагент.
- Дефицитная по протеину С плазма.
- Буферный раствор.
- Образец БТП с известной активностью протеина С.
- Коагулометр.
Образцы крови для исследования
Для определения активности протеина С используют БТП.
Для построения калибровочной кривой необходим образец БТП с известной активностью протеина С. Для построения калибровочного графика используют время свертывания в секундах, полученное при исследовании разведенных калибровочных образцов с известной активностью протеина С.
В клинической картине при врожденном дефиците протеина С доминируют рецидивы венозных тромбозов и тромбоэмболий. У ряда пациентов возникают кожные некрозы, невынашивание беременности и др. У новорожденных, имеющих дефицит протеина С, нередко наблюдается злокачественная пурпура (purpura fulminans).
Приобретенный дефицит протеина С может быть обусловлен недостаточным синтезом гепатоцитами, повышенным расходом вследствие ДВС, лечением непрямыми антикоагулянтами и др. У некоторых пациентов с ВА наблюдается завышение его активности.
Причины ошибок
- Ошибки преаналитического этапа исследования.
- Попадание в исследуемую кровь гепарина из венозного катетера.
Другие аналитические технологии
Функциональную активность протеина С определяют амидолитическими или коагуляционными методиками.
Для определения концентрации протеина С используют ИФА, однако при сравнении результатов иммунологических и функциональных методик наблюдается несовпадение результатов у пациентов с молекулярными аномалиями протеина С.
Активность протеина S
Протеин S - витамин К-зависимый гликопротеид, участвующий в качестве неферментного кофактора активированного протеина С в протеолитической деградации коагуляционных факторов Va и Villa. Ген, ответственный за синтез протеина S, расположен на хромосоме 3 человека в положении pll.l-qll.2. В крови протеин S представлен в двух вариантах: в виде свободного протеина (около 40 %) и в виде связанного с С4Ь-компонентом комплемента (около 60 %). Снижение активности протеина S увеличивает риск развития тромбозов и тромбоэмболий.
Принцип метода
Функциональные методики основаны на учете выраженности удлинения времени свертывания смеси дефицитной по протеину S плазмы и исследуемой плазмы при введении в тест-систему активированного протеина С. Для оценки времени свертывания в подобной тест-системе производители используют разные стимуляторы коагуляции (яд гадюки Рассела, АПТВ-реагент, активированный коагуляционный фактор IX или др.). При нормальном содержании протеина S под влиянием активированного протеина С происходит существенное удлинение времени свертывания (за счет разрушения неферментных факторов коагуляции), тогда как при недостаточности протеина S оно выражено значительно слабее (за счет неэффективного разрушения неферментных факторов активированным протеином С).
Реактивы и оборудование
- Дефицитная по протеину S плазма.
- Активирующий реагент (фосфолипиды, яд гадюки Рассела или иные активаторы, нейтрализатор гепарина и др.)
- Активированный протеин С.
- Раствор кальция хлорида (0,025 М).
- Буферный раствор.
- Образец БТП с известным содержанием протеина S.
- Коагулометр.
Образцы крови для исследования Для определения активности протеина S используют БТП.
Методика определения
Ход определения активности протеина S существенно различается при использовании реагентов и оборудования разных производителей, поэтому последовательность действий врача-лаборанта должна строго соответствовать инструкции к набору реагентов и его адаптации к имеющемуся в лаборатории коагулометру.
Оценка результатов исследования
Исследование времени коагуляции разведенных образцов БТП с известной концентрацией протеина S позволяет построить калибровочную кривую и определить активность этого физиологического антикоагулянта в процентах от нормы.
У здоровых людей активность протеина S находится в диапазоне 60-130 %.
Интерпретация результатов исследования
Врожденный дефицит протеина S - редкий дефект антикоагулянтного звена гемостаза. Первое описание дефицита протеина S было представлено в 1984 г. Н.Р. Schwarz at al. В клинической картине этого заболевания доминируют рецидивирующие флеботромбозы и тромбоэмболии. Как и многие другие дефекты антикоагулянтного звена гемостаза, эта патология передается аутосомно. Принято различать три типа врожденного дефицита протеина S.
Варианты врожденного дефицита протеина S
- Тип: I Коалиционный метод: Снижен; Свободный протеин S: Снижен; Общий протеин S: Снижен.
- Тип: II Коалиционный метод: Снижен; Свободный протеин S: Норма; Общий протеин S: Норма.
- Тип: III Коалиционный метод: Снижен; Свободный протеин S: Снижен; Общий протеин S: Норма.
I тип характеризуется низким содержанием протеина S при использовании разных вариантов его иммунологического определения, а также снижением его функциональной активности. При II типе дефицита наблюдается снижение функциональной активности, однако общая и свободная фракции протеина S не нарушены. III тип проявляется сочетанным снижением функциональной активности протеина S и свободной его фракции. Таким образом, для идентификации типа дефицита протеина S необходимо использовать коагуляционный и иммунологический методы его определения.
В клинической практике гораздо чаще встречается приобретенный дефицит протеина S. Снижение активности протеина S можно обнаружить при нефротическом синдроме, беременности, лечении эстрогенами, L-аспарагиназой и др. У новорожденных с дефицитом протеина S наблюдается злокачественная пурпура (purpura fulminans).
Причины ошибок
- Гепарин из венозного катетера.
- Гемолиз в исследуемом образце крови.
- Неправильная дозировка цитрата при заборе крови.
Другие аналитические технологии Довольно широко распространен метод, основанный на применении ИФА для определения свободного протеина S и связанного с С4Ь-компонентом комплемента. Кроме того, описаны (но не представлены на рынке) функциональные методики определения этого антикоагулянта, основанные на использовании хромогенных субстратов.
Референтные величины концентрации протеина С в плазме - 70-130%.
Протеин С - витамин К-зависимый гликопротеид плазмы крови. Синтезируется печенью в виде неактивного профермента, который под влия
нием комплекса тромбин-тромбомодулин превращается в активную форму. Активированный протеин С - антикоагулянтный энзим, селективно инактивирующий Vа и VIIIa факторы путём их гидролиза в присутствии ионизированного кальция, фосфолипидов и его кофактора - протеина S, тем самым препятствуя переходу протромбина в тромбин.
Определение протеина С - дополнительный тест для оценки состояния антикоагулянтной системы. Дефицит протеина С связан с высоким риском развития тромбоза, особенно венозного тромбоза и тромбоэмболии лёгочной артерии у молодых людей.
Дефицит протеина С - частая причина тромбоэмболических заболеваний у пожилых людей, поэтому определение его показано у больных старше 50 лет, страдающих тромбозами (у данной категории пациентов распространённость дефицита протеина С составляет 25-40%) . Недостаточность протеина С может быть двух типов: количественная (тип I) - низкая концентрация самого протеина, и качественная (тип II) - протеин присутствует, но он неактивен или мало активен. При врождённой гетерозиготной недостаточности протеина С его активность составляет 30-60%, при гомозиготной - 25% и ниже. Дальнейшие исследования показали, что резистентность к протеину С (неактивный протеин С) объясняется генетически обусловленным дефектом фактора V (и фактора VIII в других случаях) - аномалия Лейдена . Наиболее частая причина приобретённой резистентности к протеину С - нарушения в иммунной системе.
Особенность антикоагулянтного действия протеина С заключается в том, что он не оказывает влияния без присутствия кофактора - протеина S (так же, как гепарин неэффективен без АТШ), поэтому рекомендуют определение протеина С проводить совместно с протеином S.
Снижение концентрации протеина С в крови наблюдают при беременности, заболеваниях печени, дефиците витамина К, ДВС-синдроме, го-моцистеинурии. При нефротическом синдроме протеин С может теряться с мочой. Непрямые антикоагулянты, пероральные контрацептивы снижают концентрацию протеина С.
Для лечения и профилактики тромбозов у больных со сниженной концентрацией протеинов С/S применяют антагонисты витамина К; однако из-за короткого периода их полужизни в крови, на начальном этапе терапии пероральными антикоагулянтами наблюдают транзиторное состояние гиперкоагуляции, обусловленное более быстрым падением содержания этих протеинов по сравнению с витамин К-зависимыми факторами свёртывания. В связи с этим у больных с исходно сниженной концентрацией протеинов С/S в крови высока вероятность развития некроза кожи, вызванного кумаринами. Во избежание этого эффекта таким больным рекомендуют начинать лечение антагонистами витамина К на фоне гепаринотерапии и отменять гепарин только после достижения требуемого стабильного уровня антикоагуляции .
Обновлено: 2019-07-09 21:45:30
- Средняя концентрация Hb в эритроците (MCHC, mean corpuscular hemoglobin concentration) - показатель насыщенности эритроцитов Hb. Референтные величины
